Schlüsselwort: PTC124

Das SSADH-Defizit ist eine seltene, autosomal-rezessiv vererbte Stoffwechselstörung, bei welcher es durch den Mangel des NAD+-abhängigen Enzyms Succinat-Semialdehyd-Dehydrogenase (SSADH) zur mangelnden Umwandlung von Succinat-Semialdehyd zu Succinat und zu einem Anstieg des GABA- und vor allem des GHB-Spiegels kommt. Folgen können sich in Form von Verzögerungen der motorischen, mentalen und sprachlichen Entwicklung darstellen, wobei der Schweregrad von leicht bis schwer reichen kann. Bislang sind noch keine effektiven Therapiemöglichkeiten bekannt. Es ist lediglich eine Linderung der Symptome möglich, wie zum Beispiel die Verbesserung der Motorik durch Physiotherapie und die der Sprache durch Logopädie. Das Hauptziel dieser Arbeit bestand aufgrund der fehlenden Therapiemöglichkeiten darin, Therapieansätze für Nonsense-Varianten bei SSADH-Defizit zu erforschen. Dafür wurden die Auswirkungen der Behandlungen verschiedener Nonsense-Varianten (Gln79X, Tyr128X, Gln133X, Lys192X, Trp204X, Ser251X, Arg261X, Arg412X, Gln477X, Arg514X und Tyr519X) mittels „translational read-through inducing drugs“, wie Amlexanox, Gentamicin und PTC124, sowie mit dem mRNA-stabilisierenden Coffein anhand von Western-Blots sowie eines Fluoreszenz-basierten SSADH-Aktivitätsassays untersucht. Die Untersuchungen ergaben, dass die Behandlungen aller Varianten mit den einzelnen Substanzen Amlexanox, Gentamicin oder PTC124 im Western-Blot keine systematisch verstärkte Proteinexpression aufwiesen. Im Aktivitätsassay wurde nur bei der Variante Trp204X durch die Behandlung mit Amlexanox eine signifikante Steigerung der SSADH-Aktivität ersichtlich. Die Doppelbehandlungen führten in der Aktivitätsmessung wiederum zu keiner signifikanten Steigerung der SSADH-Aktivität. Im Western-Blot zeigte die Behandlung mit Amlexanox und Coffein bei den Varianten Gln79X, Lys192X, Trp204X und Arg412X ein systematisch positives Ergebnis. Bei der Behandlung mit PTC124 und Coffein war das Ergebnis bei den Varianten Gln79X, Lys192X und Trp204X ebenfalls systematisch positiv. Da die Ergebnisse des Western-Blots und der Aktivitätsmessung zum Teil variieren, ist nicht klar zu sagen, ob die Therapien am Patienten erfolgversprechend wären. Insgesamt lässt sich aus den Ergebnissen allerdings schließen, dass die Behandlung der Nonsense-Varianten bei SSADH-Defizit Varianten-spezifisch erfolgen sollte.